核酸外切酶

内切酶和外切酶的定义是什么？

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二、限制性核酸内切酶的命名
按酶的来源的属、种名而定，取属名的第一个字母与种名的头两个字母组成的三个斜体字母作略语表示；如有株名，再加上一个字母，其后再按发现的先后写上罗马数字。例如：从流感嗜血杆菌d株（Haemophilus influenzae d）中先后分离到3种限制酶，则分别命名为HindⅠ、HindⅡ和HindⅢ。
三、限制性核酸内切酶的分类
按限制酶的组成、与修饰酶活性关系，切断核酸的情况不同，分为三类：
Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成，兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性，它能识别和结合于特定的DNA序列位点，去随机切断在识别位点以外的DNA序列，通常在识别位点周围400-700bp。这类酶的作用需要Mg2+，S腺苷甲硫氨酸及ATP。
Ⅱ类限制性核酸内切酶 与Ⅰ类酶相似，是多亚蛋白质，既有内切酶活性，又有修饰酶活性，切断位点在识别序列周围25-30bp范围内，酶促反应除Mg2+外，也需要ATP供给能量。
Ⅲ类限制性核酸内切酶 只由一条肽链构成，仅需Mg2+，切割DNA特异性最强，且就在识别位点范围内切断DNA。是分子生物学中应用最广的限制性内切酶。通常在重组DNA技术提到的限制性核酸内切酶主要指Ⅱ类酶而言。
表1 DNA重组技术中最常用的工具酶
酶 主要用途
限制性核酸内切酶 识别DNA特定序列，切断DNA链
DNA聚合酶Ⅰ
或其大片段（Klenow） ①缺口平移制作标记DNA探针
②合成cDNA的第二链
③填补双链DNA3’凹端
④DNA序列分析
耐热DNA聚合酶（Taq DNA聚合酶等） 聚合酶链反应（PCR）
DNA连接酶 连接两个DNA分子或片段
多核苷酸激酶 催化多核苷酸5’羟基末端磷酸化，制备末端标记探针
末端转移酶 在3’末端加入同质多聚物尾
SI核酸酶，绿豆核酸酶 降解单链DNA或RNA，使双链DNA突出端变为平端
DNA端酶Ⅰ 降解DNA，在双链DNA上产生随机切口
RNA酶A 降解除RNA
磷酸酶 切除核酸末端磷酸基

核酸内切酶与外切酶具体有那些区别

1、分类不一样：外切酶按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶。核酸内切酶分为DNaseⅠ和DNaseⅡ。2、应用不一样：外切酶可以用来测定基因组DNA中一些特殊的间隔序列和编码序列的位置。核酸内切酶可用于分析病原微生物DNA，通过酶切消化DNA，来了解到病原微生物遗传物质的一定特性，对于动物病毒尤其是对疫苗毒、野毒及变异毒株的检测具有重要的意义。3、概念不一样：外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。核酸内切酶是在核酸水解酶中，为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶。扩展资料：核酸内切酶的影响及因素：限制性酶切反应速度与底物的性质有很大的关系，底物的单双链结构、分子的构型、DNA链中酶识别位点的数目以及位点附近的序列等都影响着酶的催化反应。共价闭合环(超螺旋构型)DNA比其相应的线性分子的酶解作用要慢，要使超螺旋构型DNA彻底降解，需要的酶量就大。对于DNA-RNA杂合双链的酶切作用，Molloy等用EcoRI等8种酶切时，结果其 DNA链可被切割，但酶用量比双链DNA大20-50倍。部分限制性酶还可切割单链DNA，如 Hae Ⅲ等。核酸内切酶的应用：用限制性内切酶分析(Restriction EndonucleaseAnalysis REA)病原微生物DNA已成为一种常用的方法，通过酶切消化DNA，然后电泳染色呈现大小不一的片段，对这些片段的迁移率及数量进行分析，便可了解到病原微生物遗传物质的一定特性。在此基础上采用双酶切割或杂交等方法，则可推测出片段的排列顺序和酶切位点，从而推断出DNA间存在的相似性或差异性，对于动物病毒尤其是对疫苗毒、野毒及变异毒株的检测具有重要的意义。参考资料：百度百科-外切酶参考资料：百度百科-核酸内切酶

3-5 5-3外切酶有什么区别 作用方式 详细点谢谢、

核酸外切酶 就是将核酸序列3'游离端或者5'游离端逐一水解成减少一个核苷酸长度的核酸链和游离的核苷酸区别就是水解的起点端不一样3'→5'核酸外切酶就是从核酸的3'游离羟基端逐一水解核酸链5'→3'是从5'游离磷酸基团端逐一水解核苷酸链从反应的角度看 区别只有反应的方向不一样作用方式就是磷酸二酯键的水解作用一般的是水解出3'游离羟基和5'游离磷酸基团具体细节的反应机理作用方式 参见有机化学的亲和取代吧 水作为亲核试剂对5'侧的磷原子进行亲和加成 形成不稳定中间体后 3'侧的羟基发生消除反应 和一般的酯类水解类似 不过是在酶的催化作用下完成的一般的水解酶中有Ser或者Tyr等含有羟基的活性位点 可以在代替水进行亲和进攻 常见的类似的磷酸酯键的水解还有 氯解磷定或碘解磷定对未老化的有机磷农药中毒的乙酰胆碱酯酶的解毒过程……